目的 构建可作为DNA疫苗的包含人乳头瘤病毒16型（HPV16）E6E7与C3d3 融合基因真核表达质粒,并在体外进行表达和鉴定。 方法 采用PCR 技术扩增HPV16 E6E7片段，将该片段插入到pMDT18载体中后，亚克隆至真核表达载体pSG.SS.C3d3.YL和pSG.SS.YL，构建E6E7与C3d3 融合基因及E6E7表达质粒pSG.SS.E6E7.C3d3.YL和pSG.SS.E6E7.YL。经限制性酶切鉴定和DNA 序列测定后，将重组质粒pSG.SS.E6E7.C3d3.YL、pSG.SS.E6E7.YL转染COS7细胞，用Western blot及免疫细胞化学技术检测其表达。 结果 经酶切、DNA测序及转染真核细胞后表达产物的鉴定结果显示，重组质粒构建成功。 结论 构建的质粒可在真核细胞内正确表达，为其作为DNA疫苗诱导免疫效应的动物实验打下了基础。