第三军医大学校管课题资助项目
摘 要:目的 在大肠杆菌中表达人源性β淀粉样蛋白142(Aβ142),纯化表达蛋白并进行Western blot鉴定。 方法 根据Gen Bank中人源性Aβ142编码序列,分为3个片段人工合成,经退火延伸为全长dsDNA序列,酶切后连接至表达质粒pET28a(+)构建为重组质粒pET28aAβ142,转化至大肠杆菌BL21株中,筛选高表达株,诱导表达,利用Ni +株亲和纯化表达蛋白,SDSPAGE后,转印PVDF膜,进行Western blot鉴定。 结果 获得纯化的大肠杆菌表达蛋白Aβ142,表达形式为包涵体,经Western blot鉴定为人源性Aβ142蛋白。 结论 本研究获得了纯化的Aβ142蛋白,为下一步采用Aβ142标记该蛋白作为诊断分子奠定了基础。
熊坤林,杨清武,熊任平.人β淀粉样蛋白1-42在大肠杆菌中的表达纯化及鉴定[J].重庆医学,2010,(03):