摘要:目的探讨建立新生大鼠原代心房肌细胞钙超载模型的方法。方法用消化法分离新生大鼠心房肌细胞并进行原代培养。纯化后随机分为对照组（C组）、实验组（E1、E2、E3组），依次加入不同浓度（0.5、1.0、2.0 μmol/L）伊屋诺霉素（ionomycin），以钙离子指示剂Fluo3/AM负载心房肌细胞，激光扫描共聚焦显微镜检测心房肌细胞游离钙离子浓度（［Ca2+］i），建立新生大鼠心房肌细胞不同程度钙超载模型。结果(1)培养至第4天，细胞生长密度可以达到瓶底70%左右；免疫组织化学染色鉴定：90%以上培养细胞α肌动蛋白抗体染色呈阳性；（2）对照组心房肌细胞活性率为（73.00±2.37）%，与各实验组心房肌细胞活性率比较，差异无统计学意义（P>0.05）；（3）经不同浓度ionomycin处理l h后，各实验组心房肌细胞［Ca2+］i明显增高，与对照组比较，差异有统计学意义（431.54±20.97、705.87±28.34、1 305.05±53.69 vs 257.08±18.63,P<0.05），且各实验组间心房肌细胞［Ca2+］i水平随ionomycin浓度的增加而上升，实验组间比较，差异有统计学意义（P<0.05）。光镜下形态学观察表明，随ionomycin浓度的增加，荧光强度逐渐加强，呈浓度依赖性。结论应用钙离子载体ionomycin能够建立可靠的心房肌细胞钙超载模型。