国家自然科学基金资助项目
摘要:目的探讨抑制毛细血管扩张共济失调突变基因(ATM)表达对人肝癌细胞株HepG2在X线照射下细胞损伤修复的影响。方法设计3条沉默ATM的小分子干扰RNA(siRNA)的序列,用脂质体法转染HepG2细胞,筛选出有效的浓度及作用时间,分别利用实时定量PCR和蛋白质印迹法检测ATM mRNA、蛋白表达水平,MTT法检测转染后细胞增殖,流式细胞术检测X线照射后HepG2细胞周期、凋亡等生物学功能方面指标的变化。结果筛选出沉默ATM基因的siRNA有效序列。qRTPCR结果显示第3条siRNA抑制率最高,可达72%,转染后48 h的ATM蛋白表达抑制78%。转染siRNAATM 后HepG2细胞的增殖能力无明显变化,HepG2ATM组在X线照射后G2/M期细胞明显增多,S期细胞明显减少;X线照射后HepG2ATM组早期凋亡百分比是阴性对照组的2倍。结论抑制ATM表达可显著抑制肝癌细胞对辐射损伤的修复,为后期研究ATM在肝癌治疗中的作用机制提供了实验基础。
练建平,王宏梅,王传玺,等.抑制ATM表达对X线照射下肝癌细胞损伤修复的影响[J].重庆医学,2010,(11):