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大鼠脂肪干细胞复合纳米羟基磷灰石/胶原/L聚乳酸体内成骨的研究
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    摘要:目的 观察大鼠脂肪干细胞复合纳米羟基磷灰石/胶原/L聚乳酸成骨的特性。 方法 在体外分离、培养大鼠脂肪干细胞(ADMSCs),并接种于纳米羟基磷灰石/胶原/L聚乳酸(nHAC/PLA)共同成骨诱导培养7 d,将二者的复合体植入大鼠体内4、8、12周,观察成骨情况。倒置相差显微镜、流式细胞仪观察ADMSCs特征;将ADMSCs以含10%新生牛血清、0.1 μmol/L地塞米松、50 μmol/L抗坏血酸、10 mmol/L β甘油磷酸钠、0.01 μmol/L维生素D 3的高糖DMEM培养基进行成骨诱导培养,以Ⅰ型胶原免疫组化染色、碱性磷酸酶活性、RTPCR检测骨钙素表达,了解其成骨特性;以HE染色法光学显微镜下观察ADMSCsnHAC/PLA体内成骨的情况。 结果 在倒置显微镜下,ADMSCs呈成纤维细胞样长梭形外观;利用流式细胞仪对第5代ADMSCs的表面抗原分子进行检测,95%表达CD29;成骨诱导7 d,ADMSCsⅠ型胶原蛋白免疫组织化学染色阳性,胞浆呈棕黄色;ADMSCs成骨诱导14 d,碱性磷酸酶活性水平逐渐升高;成骨诱导14、21 d,ADMSCs表达骨钙素 mRNA的RTPCR鉴定显示在280 bp段有一条单一的目的条带。ADMSCs复合nHAC/PLA植入体内 4、8、12 w,见类骨质形成;随着植入时间的延长,类骨质逐渐增加。 结论 ADMSCs复合nHAC/PLA具有良好的成骨能力,是骨组织工程较理想的构建方式。

    Abstract:

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引用本文

张胜利,邓展生.大鼠脂肪干细胞复合纳米羟基磷灰石/胶原/L聚乳酸体内成骨的研究[J].重庆医学,2010,(12):

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