四川省教育厅青年基金资助项目;四川省卫生厅科研基金资助项目;泸州市科技局、泸州市医学院课题资助
摘要:目的 构建人Toll样受体1(TLR1)胞外段原核表达质粒。 方法 采用逆转录聚合酶链式反应(RTPCR)从人外周血单个核细胞(PBMC)mRNA中扩增人 TLR1胞外区cDNA;将扩增的目的基因与原核表达载体pET30a(+)质粒经NcoⅠ和NotⅠ双酶切后连接,转化E.coli BL21(DE3),筛选转化子,菌落PCR及测序验证克隆序列的正确性。 结果 测序结果表明,成功构建pET30a(+)TLR1胞外区基因重组质粒,并转化感受态 E.coli BL21(DE3)。 结论 TLR1胞外段在大肠杆菌BL21中正确克隆,为TLR1信号通路的进一步研究打下了基础。
黄 黎,周丽珍,年四季,等.人TLR1胞外段的克隆及测序分析[J].重庆医学,2010,(18):