目的探讨二十碳五烯酸（EPA）通过调控p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）信号通路对肥胖大鼠骨骼肌胰岛素抵抗的改善作用。方法将50只雄性Wistar大鼠随机分组为对照组、模型组、抑制剂组、EPA组、抑制剂+EPA组，每组10只，共干预6周。造模后抑制剂组灌胃1 mg/kg p38 MAPK抑制剂SB203580，EPA组灌胃70 mg/kg EPA，抑制剂+EPA组灌胃SB203580+EPA，模型组和对照组灌胃等体积生理盐水。测定大鼠空腹血糖、空腹血清胰岛素水平、骨骼肌组织中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）水平，采用腹腔葡萄糖耐量实验（IPGTT）和胰岛素耐受实验（ITT）评价大鼠胰岛素抵抗程度，采用Western blot法和实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法测定大鼠骨骼肌组织中磷酸化p38（p-p38）蛋白及p38 mRNA表达情况。结果与对照组相比，模型组大鼠体重、附睾脂肪湿重、空腹血糖、空腹胰岛素水平、IPGTT血糖水平、ITT血糖水平、MDA水平明显升高，GSH-Px和SOD活性明显降低，骨骼肌组织中p-p38蛋白表达和p38 mRNA表达明显升高（P<0.05）。与模型组相比，EPA组和抑制剂+EPA组大鼠的体重和附睾脂肪湿重明显降低，抑制剂组和EPA组大鼠空腹血糖、空腹胰岛素水平、IPGTT血糖水平、ITT血糖水平、MDA水平明显降低，GSH-Px和SOD活性明显升高，骨骼肌组织中p-p38蛋白表达明显降低（P<0.05），但骨骼肌组织中p38 mRNA表达无明显改变（P>0.05）。结论EPA可能是通过抑制p38 MAPK信号通路减轻氧化应激反应，从而改善肥胖大鼠骨骼肌胰岛素抵抗。