目的建立基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）基因分型检测技术，并应用于探索血小板抗原（HPA）-29-35w低频基因在广西地区献血人群中的多态性。方法确定7个目的基因突变位点在单核苷酸多态性数据库（dbSNP）中的rs号，利用MassARRAY平台在线引物设计工具Assay Design Suite（ADS）设计21条引物，构建7个插入HPA-29bb-35bb突变型序列的过表达载体。在广西地区献血者中随机选择29名献血者的标本和载体进行 iPLEX Pro多重基因分型分析与质谱检测；同时，对上述标本进行测序，将测序结果与质谱检测结果进行对比验证，建立MALDI-TOF MS基因分型检测技术。随后采用该技术对588名广西地区献血者的标本进行HPA-29-35w基因分型检测和多态性分析。结果MALDI-TOF MS对HPA-29-35w基因分型检测结果与测序结果一致。HPA-29-35w基因分型结果显示，588名广西地区献血者的HPA-29-35bw基因型均为aa纯合子。结论成功建立MALDI-TOF MS对HPA-29-35w基因分型检测技术，并应用于广西地区献血人群的HPA-29-35w基因筛查。